酶免疫分析技术详细讲解

    酶免疫分析技术是标记免疫分析中的一项重要技术。酶催化底物是检测中常用的主要试剂，因为它是一种发光剂。因此，该方法采用特定仪器进行测量，以获得体反应的特异性与酶催化底物反应的有效结合。

    酶免疫技术的结果。该技术在检验医学中的广泛应用也可以在一定程度上提高发光酶的免疫分析。该方法是实验结果的新技术发展和准确性。更多相关知识阅读参考：酶联免疫吸附试验的原理和过程

    随着酶免疫技术的不断创新，发光信号可以在其他先际测定中得到增强，发光信号持续时间稳定术的有效结合可以有效提高酶免疫技术的分析敏感性，克服传统发光酶免疫分析的缺陷。

    此外，酶免疫技术的应用操作简单，检验结果准确BAS—酶联免疫吸附试验。该实验方法逐渐扩大了检验医学中生物素准确性高的应用范围。在这里，亲和素BAS放大系统与ELISA相结合。

    目前，免疫检测中的标记技术主要包括酶免疫技术、荧光免疫技术、放射性免疫技术、金免疫技术、化学发光免疫技术等。酶免疫技术是一种免疫检测技术，它以酶标记的抗体（抗原）为重要试剂，结合了抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性。酶免疫技术作为三种经典标记技术之一，在检测医学中得到了广泛的应用和更新。

    一、常用酶及着色底物

    用于酶免疫技术标记的酶应具有较高的催化活性和较强的催化一致性；与抗原抗体偶联后，不影响抗原抗体的免疫反应和酶活性；催化底物易于制备，催化底物产生的信号产物易于观察和检测；目前常用的酶和底物见表1。

    二、标记物的制备

    酶免疫技术中标记物的抗原应具有高纯度和完整性；标记物的抗体应具有良好的特异性、高效率、高亲和力、高活性、批量生产和易于分离和纯化。

    制备酶标记物的方法应简单，产量高；防止酶、抗体（抗原）和酶标记物产生聚合物；标记反应不影响酶的活性和抗原抗体的免疫反应。标记制备方法基本上分为两类：

    (一)交联法

    交联法是一种与酶和抗体(抗原)相结合的交联剂“桥”，各自连接酶和抗体(抗原)的方法，目前最常用的方法是戊二醛交联法，形成的组合物是酶-戊二醛-抗体(抗原)

    (二)直接法

    直接方法是先用活性剂将酶活性，活性酶分子上的基团可以直接与抗体（抗原）结合产生标记物，如碘酸钠法。形成的组合物是：酶抗体（抗原）。

    三、酶免疫技术类型

    酶免疫技术分为酶免疫组化技术和酶免疫测定（EIA），酶免疫测定可分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定。

    (1)均相酶免疫测定

    均相酶免疫测定是一种利用酶标记物结合成抗原抗体复合物后抑制标记酶活性的技术，因此反应后不需要分离组合和分散的酶标记物，直接测定系统中总标记酶活性的变化，从而确定组合酶标记物的总数，从而获得待测物体的含量。常用于药物、激素、药物、兴奋剂等半抗原或小分子抗原的测定。常用的技术类型包括：

    1.酶免疫增强测定技术（EMIT）：酶免疫测定增强技术中酶活性的抑制是由于标记抗原与抗体结合后的空间位阻碍了酶与底物结合的部分。常见的反应竞争方法，即当抗原和抗体结合较多时，抗原和抗体结合较少，酶活性抑制较少，酶活性较高。因此，最终测量的酶活性与未标记物的含量呈正相关。

    2.复制酶供体免疫分析（CEDIA）：在复制酶供体的免疫分析中，酶存在于供体和受体两个片段中。只有两个片段结合在一起产生全酶，才能具有活性。当标记供体酶的抗原和抗体结合时，空间位阻止酶供体（ED）与酶受体（EA）活性全酶不能形成，酶活性受到抑制。反应模式也是竞争性分析的结合，最终测量的酶活性与未标记的抗原含量呈正相关。见图2。

    (1)异相酶免疫测定

    异相酶免疫测定与均相酶免疫测定的主要区别在于抗原抗体反应平衡后，反应系统中有两种分散和组合的酶标记物。两个标记物上的酶都具有酶活性，只有组合酶标记物的形成和含量才代表待测物体的存在和含量。因此，有必要将分散和组合的酶标记物分离，以确定组合状态的酶标记物的活性，并计算待测物体的含量。由于分离和组合标记物的方法不同，异相酶免疫测定分为液相酶免疫测定和固相酶免疫测定两种方法。液相酶免疫测定，由于分散和组合标记物存在于液相中，因此需要在组合状态的酶标记物状态的酶标记物的活性。固相酶免疫测定是将组合状态的酶标记物吸附在固相支撑物上，只需清洗即可去除分散的酶标记物。目前，固相酶免疫测定采用酶联免疫吸附试（ELISA）为最常用。想要了解更多孕育知识请点击：华泽优孕