冷冻精子的过程通常是取出男性精子,然后适当选择,最终需要冷冻和储存优秀的精子,这是更复杂的。
冷冻精子在临床上很常见。冷冻前需要穿刺男性睾丸和附睾,然后取出精子。这是一种体外冷冻方法。精子取出后,一般需要清洗和筛选,然后去除变异和精子畸形。最后,优秀的精子被冷冻和储存。储存前应清除炎症细菌和病毒,需要专业生殖医生操作。更多相关知识阅读参考:做试管供卵时冷冻管是干什么用的
冷冻精子可暂时冷冻精子活力,属于低温环境中的长期储存技术,一般用于试管婴儿。
(一)精子收集
戒欲期(一般为3~5d)之后,精子通过手淫收集到10~20mL在无菌聚丙烯样品收集容器中。戒欲期是为了更好地冷冻和保存样品。一般来说,与收集前戒欲期短、不规则的精子相比,冷冻保存的特性更稳定、更完善。
射出的精液是液体,但通常立即凝结成胶状。凝结的精液通常是30min内液化可以在这个时候测量它的体积。为了最大限度地提高精子的冷冻活力,精液收集后需要1min液化精子开始冷冻保存。
(二)测量体积
可以使用更准确的加样器或带针的5mL注射器可以测量,有时可以根据收集精液前后采样瓶的重量差来计算。.1~0.2mL精液进行精液分析(活性精子的百分比及其质量、精子密度等,参照本书的相关章节)。此外,还需要取出一些精液,用于检查某些性传染病的选择,并进行一些检查,以选择奈瑟淋球菌等微生物(详细的相关章节)。
甘油化
甘油作为冷冻保护剂,可以分步直接参与未经处理的精液。每次加入后混合均匀,时间间隔为1min;或间接作为扩张液或基液的成分,稀释后逐渐添加精液。然而,在美国和加拿大,40%以上的著名精子库仍然单独使用甘油作为冷冻保护剂,而越来越多的新精子库使用扩张剂,特别是含甘油的两性离子缓冲系统。
甘油化不一定涉及独特的温度条件(室温除外)和接触时间(加甘油和混合所需时间除外)。
(4)观察包装和生存能力
甘油化精液可吸入塑料吸管(可用密封剂、加热或用尼龙塞密封)或放入玻璃安瓿(用火焰密封)或放入塑料冷冻管(冷冻瓶),然后用螺钉盖拧紧。每种冷冻精液的体积一般为0.4~0.8mL,这可以作为人工授精的单位。当然,如果合适,人工授精也可以使用单位以上的精液。选择用于冷冻和保存精子的容器是非常重要的。该容器应易于标记、操作和储存,并具有良好的生物兼容性和抗压性。高质量的聚丙烯吸管或小瓶似乎最符合这些标准,没有易碎、被洗涤剂污染等玻璃容器的缺陷。
在液氮冷冻之前,除了分装冷冻和储存的精子外,还需要准备一个质量控制测试样品。对于收集后未经处理的精液,应观察冷冻保护剂和储存前的活性精子及其活性。观察可以跟踪冷冻保存各阶段的精子存活情况,确保了解冷冻精子的存活能力。
(五)冷冻
吸管、安瓿中的精液可分散或成组储存,其位置保持垂直、水平或倾斜。一般放入液氮雾中,有时也可放入机械(电子)冷冻柜的冷冻空气中。冷却和冷冻过程可以手动静态或逐渐完成,也可以由计算机控制的液氮供应系统完成。最常用的是操作人员使用液氮储存容器中的气相直接一次或逐渐冷冻。含有吸附液氮的石棉垫片的生物干燥运输器也可用于气相冷冻,然后转移到储存容器。
(六)储存
分装样品应储存在金属容器中的液氮中,这些容器应放置在适当的液氮冷冻箱中。用于监测液氮平面的装置机械和(或)电子长期保存在高于液氮温度(-196℃)在这种情况下,为了避免精子功能的丧失,监测平面的常用机械(手动)方法是将带刻度的插杆垂直放入液氮底部并拔出,从而在其上方形成霜线,以指示液氮平面。许多国家已经销售了各种复杂的局部和遥控电子预警系统。另一方面,少数精子库只使用闪烁灯定期用人眼检查,AATB组织库标准只需要有效的监测程序,以确保样品始终保存在液氮表面下。冷冻生物学家和相关研究人员发现,在冷冻开始时,精子活动力在融解和储存前样品并进行检查时丢失。然而,它在液氮表面下保存-196℃冷冻精子的活性并没有进一步丧失。我们已经证实,癌症患者在治疗前精液中的精子冷冻活性通常很差(解冻后精子活性的百分比减少)。即便如此,在长期储存期间,这种减少的运动能力并没有进一步降低。
调查的42家AATB在成员的组织数据库中,只有两个报告了长期储存期间精子活动力丧失的例子由正常精子供应商和(或)治疗前患者提供。只有一份报告称,精子活动力在冷冻3年后丧失。人们可以接受的观点是,储存过程中精子活动力丧失是由于冷冻前没有准确测量或更有可能是由于最佳储存条件没有得到保证造成的。
(七)解冻
将含有冷冻精子的包装盒暴露在气体或水中,使冷冻精液恢复液体。它通常暴露在室温下,但也暴露在其他温度下,这取决于每个精子库的设计方法。
(八)派发
如果临床医生需要冷冻精子IVF-ET,精子库应按要求送至医生所在医院(或)诊所。冷冻精子从精子库的储物柜中取出后,应提前放置在装有液氮或固体二氧化碳(干冰)的独特运输箱中。但是,如果精子库在医院,靠近手术室,可以直接送到手术室供医生使用,而无需放入上述特殊运输箱。冷冻精子在临床使用前的融化有利于通过质量控制再次评估精子冷冻的生存状态。想要了解更多相关请点击:华泽优孕
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